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  • 产品名称:人卵巢癌细胞

  • 产品型号:T25
  • 产品厂商:ATCC
  • 产品价格:0
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简单介绍:
人卵巢癌细胞我公司提供各大细胞库细胞株,ATCC、ECACC、DSMZ、中科院、各大学研究中心等,一共1000余株,货期短、价格低欢迎咨询!!人卵巢癌细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**。
详情介绍:
细胞规格:T25一瓶
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:4 传代
细胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、**、酵母和**
产品注明 细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和**。
增值能力取决于细胞取材、培养技术、培养条件等综合因素。请按照正确的培养方法来解冻、传代,以此保证细胞具备良好的增殖能力,方便您的后继研究顺利进行
 
    人卵巢癌细胞是一个独立有序的、能够进行自我调控的结构与功能体系。每一个细胞都具有一整套完整的装置以满足自身代谢的需要。单细胞生物能够独立地进行全部的生命活动。在多细胞生物中,尽管每一个细胞的功能受到整体的协调与控制,但每一个细胞都是一个独立的、自我控制的、高度有序的代谢系统,有相对独立的生命活动,各种组织都是以细胞为基本单位来执行特定的功能,整个机体的新陈代谢活动都是以细胞为单位协调地进行的。
只要具备合适的生存条件,每一个分离的细胞都可以在体外生长繁殖,表现出生命的特征。
体外培养的细胞直接生活在培养基中,因此培养基应能满足细胞对营养成分、促生长因子、激素、渗透压、pH等诸多方面的要求。
 
人卵巢癌细胞常规培养传代流程请严格遵照无菌操作
1、吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞注意把握消化时间,通常控制在1-2min
2、镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时不建议消化到细胞漂浮去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散
3、取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养
4、注意培养基PH值变化情况,定期换液每周2-3次,待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存
特别注意:如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养
 
人卵巢癌细胞冻存的步骤
(1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天*好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟)。
(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择。
(3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)
(4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)*好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐。
(5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,*好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
 
人卵巢癌细胞注意事项: 
1.使用DMSO 前,不需要进行高压**,它本身就有**的作用。高压**反而会破华它的分子结构,以至于降低冷冻保护效果。在常温下,DMSO 对人体有害,故在配制时*好戴上手套操作。
2.不宜将冻存细胞放置在 0℃~-60℃这一温度范围内过久,低温损伤主要发生在这一温度区内,是“危险温区”。
3.注意定期检查液氮罐内液氮量,及时添加。
 
人卵巢癌细胞冻存及复苏基本知识普及:
   细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
    除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO,可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。
采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。